WAT IS PCR? HOE WERKT PCR? SNELLE PCR Deze PCR-methode maakt gebruik van een snellere cyclus, zoals weergegeven in de onderstaande tabel, waarbij de tijd voor 30 cycli wordt teruggebracht van 70 naar 30 minuten. Denaturatie (95°C) Hybridisatie (40° C - 60° C) Elongatie (72°C) Totale tijd (30 cycles) TraditionelePCR 45s 45s 45s ~70 minuten Snelle PCR 30s 0s 30s ~30 minuten Materialen 778372 Inzicht in PCR - Edvotek experiment 778540 PCR apparaat 544150 Elektroforese station 544124 Voeding voor elektroforese 067700 Microcentrifuge 544450 Transilluminator Magnetron/kookplaat Algemeen laboratoriumapparatuur Werkwijze 1. Meng 20 μL primer mix, 5 μL DNA monster en 1 st. PCR EdvoBead 2. Vermeerder het DNA-materiaal met PCR zoals aangegeven in de bovenstaande tabel 3. Pak een voorbereide agarosegel, plaats deze in het elektroforeseapparaat en voeg de buffer toe 4. Breng het DNA-materiaal over naar de gel 5. Voer de gel-elektroforese uit 6. Bekijk het resultaat op de transilluminator (na eventuele eerdere kleuring, zie de handleiding) Zie meer informatie over het experiment in de practicumhandleiding die bij de set is geleverd. Verwerking: Welke invloed heeft het op het resultaat als er minder of meer PCR-cycli worden gebruikt? Wat is verontreiniging en hoe kan een controlemonster mogelijke verontreining detecteren? 12 / eurofysica.nl
Download PDF fil